目的:鑒定凡納濱對(duì)蝦分子質(zhì)量40 kD過(guò)敏原,并分析其在有殼水產(chǎn)食物中的免疫交叉反應(yīng)。方法:運(yùn)用基質(zhì)輔助激光解析串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(matrix assisted laser desorption ionization/time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF/TOF-MS)鑒定凡納濱對(duì)蝦40 kD過(guò)敏原組分;使用軟件BLAST、Clustal X2、MEGA 5.0分析該蛋白氨基酸序列的種間同源性;制備抗凡納濱對(duì)蝦過(guò)敏原精氨酸激酶的多克隆抗體,并與17 種常見(jiàn)有殼水生動(dòng)物粗提液進(jìn)行Western blotting,以分析該過(guò)敏原的免疫交叉反應(yīng)。結(jié)果:凡納濱對(duì)蝦40 kD過(guò)敏原為精氨酸激酶(arginine kinase,AK);其氨基酸序列同源性分析顯示AK在蝦類(lèi)(96%~100%)、蟹類(lèi)(91%~93%)、貝類(lèi)(49%~52%)、蟑螂(83%)中具有很高的同源性;Western blotting結(jié)果顯示抗AK多抗與17 種不同蝦類(lèi)、蟹類(lèi)、貝類(lèi)的AK均能發(fā)生反應(yīng)。結(jié)論:精氨酸激酶在甲殼類(lèi)動(dòng)物、軟體動(dòng)物、甚至昆蟲(chóng)中具有高度保守性,且能引起強(qiáng)免疫交叉反應(yīng),是有殼水生動(dòng)物中的一種泛過(guò)敏原。
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