
雞卵類(lèi)黏蛋白(hen’s egg ovomucoid,HOVM)是雞蛋清中最重要的過(guò)敏原蛋白,探討三步沉淀(一步三氯乙酸沉淀以及兩步硫酸銨鹽析沉淀)從雞蛋清中提取并純化HOVM的工藝條件,并利用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳以及高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)技術(shù)檢測(cè)純化效果。結(jié)果表明:用等體積去離子水稀釋的雞卵清液加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%三氯乙酸去除大部分雜蛋白后,所得上清液加入硫酸銨至終飽和度50%,鹽析沉淀進(jìn)一步去除非HOVM的雜蛋白,上清液中最后再追加硫酸銨至終飽和度80%,離心所得沉淀再經(jīng)過(guò)透析凍干即為高純度的HOVM;HPLC(檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm)檢測(cè)所獲HOVM的純度為99.202%,此工藝條件下得到HOVM的提取率約為27.05%。
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