以仿刺參腸道組織為原料,優(yōu)化酶解工藝條件,研究梯級(jí)肽對(duì)小鼠原代巨噬細(xì)胞過(guò)氧化氫損傷的保護(hù)作用。采用單因素試驗(yàn)及響應(yīng)面試驗(yàn)分析法對(duì)酶解工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,利用超濾法獲取不同截留分子質(zhì)量的肽段,采用噻唑藍(lán)(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法檢測(cè)細(xì)胞活力。結(jié)果表明:通過(guò)響應(yīng)面優(yōu)化得最佳條件為:酶解溫度50.10 ℃、酶解時(shí)間2.84 h、加酶量2.639萬(wàn) U時(shí)水解度可達(dá)41.82%。通過(guò)超濾制備,分別得到分子質(zhì)量小于650、650~1 000 u與1 000~10 000 u肽段,各肽段均能顯著提高過(guò)氧化氫損傷細(xì)胞的細(xì)胞活力值,所獲肽段對(duì)過(guò)氧化氫損傷巨噬細(xì)胞具有顯著保護(hù)作用,其中小于650 u肽段更佳。
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