采用超高壓處理菠蘿蛋白酶,研究菠蘿蛋白酶結(jié)構(gòu)變化與酶活力的關(guān)系。采用傅里葉紅外光譜(Fouriertransform infrared spectrometer,F(xiàn)TIR)檢測二級結(jié)構(gòu)變化,熒光光譜檢測三級結(jié)構(gòu)變化,采用福林酚法測定酶活力。結(jié)果顯示,與0.1 MPa相比,在37 ℃,不同壓力(100~500 MPa)處理20 min,對菠蘿蛋白酶活力均有顯著影響(P<0.05)。200 MPa處理時(shí),酶活力達(dá)到最大值(3 524 U/g),提高了8.29%。200 MPa處理后的菠蘿蛋白酶,經(jīng)傅里葉紅外光譜分析結(jié)果顯示,β-折疊含量比常壓下增加了1.76 倍。內(nèi)源性熒光光譜結(jié)果顯示,280 nm波長處激發(fā),熒光強(qiáng)度達(dá)到最高4 934。因此,菠蘿蛋白酶的活性與β-折疊的含量以及親水性Typ殘基的暴露程度有關(guān)。
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