TBt是苦蕎中的主要過(guò)敏蛋白,為了研究Cu2+對(duì)其結(jié)構(gòu)及致敏性的影響,本實(shí)驗(yàn)采用熒光光譜法探討Cu2+與TBt的相互作用;圓二色光譜及非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定其結(jié)構(gòu)變化;間接性酶聯(lián)免疫和抑制性酶聯(lián)免疫法鑒定Cu2+對(duì)TBt的IgG結(jié)合能力的影響。結(jié)果表明:Cu2+和TBt之間存在相互作用,二者以濃度比1∶1形成穩(wěn)定的復(fù)合物;圓二色光譜分析表明,TBt的二級(jí)結(jié)構(gòu)并未發(fā)生明顯的改變;但非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分析顯示,Cu2+與TBt作用后,可促使TBt由三聚體進(jìn)一步聚合形成六聚體。同時(shí)抑制性酶聯(lián)免疫和間接性酶聯(lián)免疫也表明,Cu2+與TBt作用形成六聚體后,由于抗原決定簇被部分遮擋,與IgG抗體結(jié)合能力降低。
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