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嬰兒配方乳粉中阪崎克羅諾桿菌解旋酶恒溫基因擴增檢測方法的建立
來源：食品科學網(wǎng) 閱讀量: 158 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 周 巍，張 薇，劉 亮，劉 東，李永波，田 浩，張 巖，張志勝
關(guān)鍵詞: 解旋酶恒溫基因擴增法；嬰兒配方乳粉；阪崎克羅諾桿菌；檢測
摘要:

目的：建立一種檢測嬰兒配方乳粉中阪崎克羅諾桿菌的解旋酶恒溫基因擴增方法。方法：根據(jù)阪崎克羅諾桿菌ITS基因設(shè)計特異性引物，優(yōu)化解旋酶恒溫基因擴增法反應(yīng)條件UvrD helicase、T4 gp32的濃度，人工添加阪崎克羅諾桿菌確定檢出限，多種致病菌在建立的解旋酶恒溫基因擴增體系中擴增驗證特異性，電泳檢測擴增產(chǎn)物。結(jié)果：解旋酶恒溫基因擴增法檢測嬰兒配方乳粉中阪崎克羅諾桿菌得到與設(shè)計序列長度一致的100 bp基因片段，檢出限為10 CFU/g，優(yōu)化反應(yīng)條件UvrD helicase、T4 gp32的終濃度分別為0.1、5.0 μg。結(jié)論：解旋酶恒溫基因擴增法用于檢測嬰兒配方乳粉中阪崎克羅諾桿菌的特異性強、靈敏度高、耗時短，為嬰兒配方乳粉中阪崎克羅諾桿菌的快速檢測提供了新的方法。

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