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酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)除草劑異丙甲草胺
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 133 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 張熾堅(jiān),王 強(qiáng),唐秋實(shí),劉英菊,孫遠(yuǎn)明,唐允健,雷紅濤
關(guān)鍵詞: 異丙甲草胺;酶聯(lián)免疫吸附分析;抗體
摘要:

將異丙甲草胺與3-巰基丙酸反應(yīng)合成出帶羧基的異丙甲草胺半抗原MMPA;用活潑酯法將半抗原與載體牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)分別偶聯(lián),制備免疫抗原MMPA-BSA和包被抗原MMPA-OVA,紫外光譜鑒定后用MMPA-BSA免疫新西蘭大白兔,成功制備出抗異丙甲草胺多克隆抗體,并建立異丙甲草胺的間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附分析(icELISA)法。該方法半抑制濃度(IC50)為34.3ng/mL,檢測(cè)限(IC10)為6.3ng/mL,檢測(cè)范圍(IC20~I(xiàn)C80)為12.3~99.2ng/mL。該抗體對(duì)其他結(jié)構(gòu)類似物無(wú)明顯交叉反應(yīng)。將該方法應(yīng)用于環(huán)境水樣中異丙甲草胺檢測(cè),回收率在89.5%~107.9%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差9.2%~14.5%。所建立的異丙甲草胺免疫分析方法特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高、靈敏度高,可用于環(huán)境水樣中異丙甲草胺的快速檢測(cè)。

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