采用硫酸銨沉淀法和離子交換法分離純化雞蛋清得致敏蛋白后免疫兔子制備抗多克隆抗體,并建立快速、靈敏、特異性強的雞蛋致敏蛋白酶聯(lián)免疫檢測方法。在優(yōu)化條件下,雞蛋致敏蛋白在1×10-4~10μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)與抑制率線性關(guān)系良好,其線性回歸方程為y=0.74145+0.21692 lgC(r=0.9971),半抑制濃度(IC50)和最低檢測限(IC10)分別為為77.076、1.104ng/mL;樣品加標(biāo)回收率在98.29%~101.55%之間;且抗雞蛋致敏蛋白多克隆抗體對火雞蛋蛋白、鴨蛋蛋白、鵝蛋蛋白均具有交叉反應(yīng),與花生、小麥蛋白無交叉反應(yīng);批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為4.63%和5.49%,且可在4℃可保存6個月以上,能夠快速靈敏檢測食品中雞蛋致敏蛋白的存在。
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