目的:探討靈芝多糖(GLP)聯(lián)合5-氟尿嘧啶(5-FU)對人結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞增殖抑制及凋亡的影響。方法:采用MTT法測定單獨和聯(lián)用GLP與5-FU對人結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞的協(xié)同抑制作用,應(yīng)用聯(lián)合指數(shù)法分析兩藥物之間相互作用,Hoechst33258熒光染色觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變,碘化吡啶(PI)標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測GLP聯(lián)合5-FU對HCT-116細(xì)胞周期和凋亡抑制率的變化。結(jié)果:MTT法測定結(jié)果顯示GLP和5-FU單獨用藥均能顯著抑制HCT-116細(xì)胞增殖。GLP(>659μg/mL)聯(lián)用5-FU(>1.6μg/mL)聯(lián)用呈協(xié)同效應(yīng)(CI<1),與5-FU單獨用藥組相比有極顯著差異(P<0.01),并呈時間依賴性。給藥48h后,Hoechst33258熒光染色可見典型的凋亡形態(tài)學(xué)特征。FCM檢測凋亡顯示兩藥聯(lián)合作用24h后,5mg/mL GLP聯(lián)合50μg/mL 5-FU的凋亡率為36.14%,高于5-FU(50μg/mL)單獨用藥組(26.07%);1.25mg/mL GLP聯(lián)合12.5μg/mL 5-FU、2.5mg/mL GLP聯(lián)合25μg/mL 5-FU、5mg/mL GLP聯(lián)合50μg/mL 5-FU作用48h后,凋亡率分別為20.95%、32.87%、30.01%,均高于5-FU(50μg/mL)單獨用藥組(14.51%)。聯(lián)合用藥組可使HCT-116細(xì)胞阻滯于S期。結(jié)論:較高質(zhì)量濃度的GLP與5-FU聯(lián)用具有協(xié)同抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,阻滯細(xì)胞周期作用。
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