目的:以青蔥與葡萄為材料,建立以豬胃黏蛋白偶聯(lián)磁珠(PGM-MB)和聚乙二醇8000(PEG8000)富集檢測水果、蔬菜中諾如病毒的方法。方法:確定病毒原液中的相對病毒量,梯度稀釋病毒原液并進(jìn)行實時熒光-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測,以每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達(dá)到設(shè)定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)值與病毒量(實時熒光-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)單位數(shù))的常用對數(shù)值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性方程;人工接種諾如病毒于青蔥與葡萄表面,洗脫后,分別用PEG8000和PGM-MB富集諾如病毒,實時熒光-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增,用標(biāo)準(zhǔn)曲線對回收的病毒進(jìn)行相對定量。結(jié)果:基質(zhì)為青蔥時,高接種量條件下,兩種富集方法的病毒回收效果相當(dāng),低接種量下,PGM-MB法的富集回收率高于PEG8000法,且PGM-MB的檢測下限更低;基質(zhì)為葡萄時,PGM-MB法的富集回收率均高于PEG8000法,且檢測下限更低。結(jié)論:PGM-MB富集效果良好,快速方便,適合應(yīng)用于水果和蔬菜中的諾如病毒的富集檢測。
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