為了提高異甘露聚糖酶活性,對實驗室保藏的一株分泌異甘露聚糖酶的枯草芽孢桿菌K-6(Bacillus subtilis K-6)進行紫外誘變育種,并優(yōu)化一株正突變株的固態(tài)發(fā)酵條件。出發(fā)菌株枯草芽孢桿菌K-6的酶活力為206.0U/mL,經(jīng)紫外線誘變處理后,挑選在培養(yǎng)基上透明水解圈較大的菌株進一步復(fù)篩,獲得枯草芽孢桿菌K-6-9高產(chǎn)突變株,酶活力為349.3U/mL,高于出發(fā)菌株69.6%。連續(xù)5代發(fā)酵,K-6-9的酶活力范圍為343.0~350.3U/mL,表明該突變菌株產(chǎn)酶性能穩(wěn)定。以K-6-9為菌種,采用單因素試驗和正交試驗進行最佳固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)酶條件的優(yōu)化,結(jié)果表明:該突變株的固態(tài)發(fā)酵適宜發(fā)酵條件為:發(fā)酵時間72h、接種量3%、初始pH 7.5、裝料量25g/250mL;培養(yǎng)基組成為:酵母細胞壁添加量8%、料液比1:1.2、麩皮添加量40%,此優(yōu)化條件下固態(tài)發(fā)酵K-6-9菌株產(chǎn)酶酶活力最高達601.6U/mL。
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