目的:對(duì)豐年蟲水溶性蛋白進(jìn)行分離純化,獲得體外抗氧化活性最好的水溶性蛋白組分,并測(cè)定其分子質(zhì)量。方法:豐年蟲水溶性粗蛋白經(jīng)硫酸銨沉淀、透析、DEAE-Sepharose FF離子交換層析和Sephadex G-100凝膠層析分離純化,對(duì)純化后的蛋白質(zhì)進(jìn)行體外抗氧化活性的研究,利用SDS-PAGE電泳測(cè)定蛋白質(zhì)分子質(zhì)量。結(jié)果:豐年蟲水溶性蛋白經(jīng)DEAE-Sepharose FF離子交換層析,梯度洗脫得到4個(gè)洗脫峰(峰1~4),峰2的體外抗氧化活性最強(qiáng)。峰2經(jīng)Sephadex G-100凝膠層析分離純化得到3個(gè)洗脫峰(峰2-1~2-3),峰2-1的體外抗氧化活性最強(qiáng)。利用SDS-PAGE對(duì)峰2-1進(jìn)行鑒定,得到單一蛋白條帶,純度較高,蛋白分子質(zhì)量為82.47kD。體外抗氧化活性比較,峰2-1遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于水溶性粗蛋白。結(jié)論:蛋白組分峰2-1體外抗氧化活性最強(qiáng),為單一蛋白組分,其分子質(zhì)量為82.47kD。
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