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Chelex法結(jié)合環(huán)介導(dǎo)間接PCR檢測肉制品單增李斯特菌
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 122 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 鄭 鳴,邊傳周,劉仲敏
關(guān)鍵詞: 環(huán)介導(dǎo)間接PCR|肉制品|單增李斯特菌
摘要:

目的:建立肉制品中單增李斯特菌環(huán)介導(dǎo)間接聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測體系,實現(xiàn)快速檢測。方法:采用Chelex法從肉制品中分離模板DNA,根據(jù)單增李斯特菌hlyA基因的保守區(qū)設(shè)計兩條探針,將探針標(biāo)記于報告基因(大豆Lectin基因)的兩端,此標(biāo)記的報告基因與待測靶基因經(jīng)雜交、缺口補平、環(huán)化后,采用反向聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增報告基因,實現(xiàn)對靶基因的檢測。結(jié)果:該檢測體系檢出限低于100CFU/g(mL),且與其他食源性致病菌的檢測無明顯交叉反應(yīng),對200份肉制品進行檢測,陽性率為2.5%,與傳統(tǒng)細(xì)菌分離檢測結(jié)果完全相符。結(jié)論:環(huán)介導(dǎo)間接聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)可以快速、靈敏、特異檢測肉制品中單增李斯特菌污染。

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