建立基于時間分辨熒光免疫分析技術(shù)的環(huán)丙沙星(CPF)間接競爭檢測方法。將環(huán)丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中CPF與CPF包被原(CPF-OVA)共同競爭限量的CPF抗體,用銪標(biāo)羊抗兔IgG示蹤,建立環(huán)丙沙星時間分辨熒光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被質(zhì)量濃度、抗體稀釋液、反應(yīng)時間等對方法靈敏度的影響。結(jié)果表明:在優(yōu)化條件下,該方法的檢測限為0.5μg/L,半抑制質(zhì)量濃度(IC50)為4.32μg/L,線性范圍(IC20~I(xiàn)C80)為1.14~28.85μg/L;該方法對蜂蜜中CPF平均回收率為80.66%~100.30%,對牛奶中CPF的平均回收率為76.30%~95.22%,兩者的平均批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為7.42%和10.92%。CPF-TRFIA間接競爭法測定環(huán)丙沙星具有靈敏度高、特異性好、性能穩(wěn)定的優(yōu)點,適于高通量篩查。
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