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環(huán)丙沙星的時間分辨熒光免疫分析方法的建立與應(yīng)用
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 163 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 李麗華,白瑞櫻,孫遠(yuǎn)明,沈玉棟,徐振林,雷紅濤,張 挺,王 弘,楊金易,*
關(guān)鍵詞: 環(huán)丙沙星|時間分辨熒光免疫分析|抗體|添加回收
摘要:

建立基于時間分辨熒光免疫分析技術(shù)的環(huán)丙沙星(CPF)間接競爭檢測方法。將環(huán)丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中CPF與CPF包被原(CPF-OVA)共同競爭限量的CPF抗體,用銪標(biāo)羊抗兔IgG示蹤,建立環(huán)丙沙星時間分辨熒光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被質(zhì)量濃度、抗體稀釋液、反應(yīng)時間等對方法靈敏度的影響。結(jié)果表明:在優(yōu)化條件下,該方法的檢測限為0.5μg/L,半抑制質(zhì)量濃度(IC50)為4.32μg/L,線性范圍(IC20~I(xiàn)C80)為1.14~28.85μg/L;該方法對蜂蜜中CPF平均回收率為80.66%~100.30%,對牛奶中CPF的平均回收率為76.30%~95.22%,兩者的平均批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為7.42%和10.92%。CPF-TRFIA間接競爭法測定環(huán)丙沙星具有靈敏度高、特異性好、性能穩(wěn)定的優(yōu)點,適于高通量篩查。

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