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海參腸乙酰膽堿酯酶親和層析洗脫條件的優(yōu)化
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 124 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 杜 英,朱蓓薇,吳海濤*
關(guān)鍵詞: 海參|乙酰膽堿酯酶|親和層析| 洗脫條件
摘要:

以3-羧基苯基-乙基二甲基銨為配基,與溴化氰活化瓊脂糖凝膠交聯(lián)制備親和層析柱,分離海參腸中乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase,AChE),對其洗脫條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果顯示:其適宜平衡體系為含0.3mol/L NaCl的PBS(0.05mol/L,pH7.4)緩沖溶液,適宜洗脫體系為含0.2mol/L四乙基碘化銨的PBS(0.05mol/L,pH7.4)緩沖溶液。此條件下,海參腸AChE可得到較好的吸附和分離,初步純化后的AChE經(jīng)Native-PAGE電泳分離出3條具有酶活性的條帶,說明AChE在海參腸內(nèi)可能以多種形式存在,呈現(xiàn)多態(tài)性。

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