以體積分?jǐn)?shù)2%苯為篩選壓力,利用羅丹明B平板顯色法和搖瓶發(fā)酵法,從采集的花生地土壤樣品中分離篩選得到1株中度耐熱、耐堿脂肪酶產(chǎn)生菌,編號(hào)為H2。通過形態(tài)觀察、生理生化特性實(shí)驗(yàn)及其16S rDNA基因序列對(duì)菌種進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明,H2菌株與短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)的親緣關(guān)系最緊密。通過研究得到該菌株的搖瓶發(fā)酵條件:產(chǎn)酶培養(yǎng)基為:蛋白胨3%、酵母膏1%、NaCl 0.5%、橄欖油1%,pH7.0,搖瓶發(fā)酵溫度為28℃,搖床轉(zhuǎn)速為180r/min,發(fā)酵周期為48~60h。所產(chǎn)脂肪酶在40℃、pH9.0時(shí)酶活性最高,對(duì)pH值和溫度的適應(yīng)范圍較寬,pH6.0~10.0比較穩(wěn)定,35~50℃具有較高酶活性。
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