以金納米顆粒(gold nanoparticles,AuNPs)為信號(hào)放大載體,利用辣根過(guò)氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)標(biāo)記的二抗為信號(hào)探針,建立一種基于AuNPs的信號(hào)放大酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法(AuNPs signal amplification enzyme-linked immunosorbent assay,AuNPs-HRP-IgG ic-ELISA),檢測(cè)食品中恩諾沙星(enrofloxacin,ENR)。該方法對(duì)ENR的檢測(cè)限(IC15)為5×10-4?ng/mL,半數(shù)抑制濃度(IC50)為0.24?ng/mL,檢測(cè)范圍為0.16~500?ng/mL,與建立的傳統(tǒng)ELISA方法(IC50=8.76?ng/mL)相比,顯著提高了檢測(cè)靈敏度,并且該方法與環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星交叉反應(yīng)率均小于0.1%,具有良好的特異性。該AuNPs-HRP-IgG?ic-ELISA方法的實(shí)用性得到了樣品添加回收實(shí)驗(yàn)和商業(yè)化ELISA檢測(cè)試劑盒的驗(yàn)證,其在牛奶樣品中的加標(biāo)回收率可達(dá)80.52%~102.66%,適用于實(shí)際牛奶樣本中ENR的快速靈敏檢測(cè),也為建立其他食品危害物質(zhì)的精準(zhǔn)檢測(cè)技術(shù)開(kāi)發(fā)提供參考。
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