本實驗選擇蛹蟲草菌株CICC 14014液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng),提取蛹蟲草胞外多糖,測定其理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu),并對其免疫活性進(jìn)行研究。采用DEAE-Sephacel陰離子交換柱聯(lián)合Sephadex G-200葡聚糖凝膠柱純化蛹蟲草胞外多糖;利用高效液相色譜法測定多糖分子質(zhì)量,利用傅里葉變換紅外光譜鑒定多糖結(jié)構(gòu);選用BALB/c小鼠構(gòu)建免疫損傷模型,考察其體質(zhì)量及免疫器官指數(shù)變化情況,觀察其脾臟組織切片形態(tài),計算其T、B細(xì)胞增殖率,測定其血清細(xì)胞因子及免疫球蛋白質(zhì)量濃度。結(jié)果表明,蛹蟲草發(fā)酵液中多糖質(zhì)量濃度為3.15 mg/mL,經(jīng)分離純化后所得單一多糖分子質(zhì)量為3.67 kDa,純度可達(dá)86.13%。動物實驗結(jié)果表明,蛹蟲草胞外多糖可明顯提高免疫器官指數(shù),能夠有效促使T細(xì)胞(低劑量時)、B細(xì)胞增殖和免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)G、IgA、IgM、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-6、IL-2、干擾素(interferon,IFN)-γ的分泌,免疫調(diào)節(jié)效果顯著。研究結(jié)果表明蛹蟲草胞外多糖可修復(fù)環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的BALB/c小鼠免疫功能損傷,為開發(fā)蛹蟲草發(fā)酵液資源建立了部分理論支撐。
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