以從自然腐敗的櫻桃上分離的鏈格孢霉(Alternaria sp.)LD3.0086為指示菌,研究苯乳酸對(duì)鏈格孢霉的主要抑制作用靶位。應(yīng)用分光光度法測(cè)定苯乳酸對(duì)鏈格孢霉的最小抑菌濃度,通過卡爾科弗盧爾熒光增白劑染液(calcofluor white,CFW)染色觀察苯乳酸對(duì)菌絲頂端生長(zhǎng)的破壞作用,利用掃描電子顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察鏈格孢霉的超微結(jié)構(gòu)變化,通過測(cè)定苯乳酸作用前后鏈格孢霉上清液中N-乙酰葡萄糖胺質(zhì)量濃度變化研究苯乳酸對(duì)菌絲細(xì)胞壁的破壞作用,應(yīng)用熒光雙染色法觀察苯乳酸對(duì)鏈格孢霉菌絲細(xì)胞膜的損傷作用。結(jié)果表明,12.5 mmol/L的苯乳酸能有效抑制鏈格孢霉的生長(zhǎng);與對(duì)照組(無菌水處理)相比,苯乳酸處理后鏈格孢霉頂端生長(zhǎng)細(xì)胞無明顯形變,經(jīng)12.5 mmol/L苯乳酸處理的鏈格孢霉上清液中N-乙酰葡萄糖胺質(zhì)量濃度基本不變;苯乳酸處理24 h,鏈格孢霉菌絲細(xì)胞壁表面無明顯損傷,細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變化;苯乳酸短時(shí)間(4 h)處理鏈格孢霉,菌絲細(xì)胞膜仍較為完整,加入苯乳酸較長(zhǎng)時(shí)間(8 h)后細(xì)胞膜發(fā)生破裂。綜合分析可知,苯乳酸對(duì)鏈格孢霉的主要作用靶位應(yīng)不是菌絲體的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,而是在菌絲體內(nèi)部,通過破壞菌絲內(nèi)部細(xì)胞器結(jié)構(gòu)或引起細(xì)胞內(nèi)的生化反應(yīng),從而抑制鏈格孢霉的生長(zhǎng)和繁殖,發(fā)揮抑菌活性。
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