采用碳二亞胺法(EDC)和混合酸酐法,分別與牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶聯(lián)制備氯霉素免疫原[CAP-HS-BSA]和包被原(CAP-HS-OVA)。經(jīng)紫外和變性電泳(SDS-PAGE)鑒定,免疫原與包被原均制備成功,偶聯(lián)比分別為1:16和1:17。利用免疫原免疫兩只新西蘭大耳白兔,制備多克隆抗體,建立間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)氯霉素殘留的方法。建立的ic-ELISA檢測(cè)氯霉素方法的半數(shù)抑制濃度(IC50)為7.275ng/ml,通過(guò)對(duì)氯霉素琥珀酸鈉和鏈霉素、青霉素及慶大霉素的交叉反應(yīng)率的測(cè)定,結(jié)果顯示抗體對(duì)氯霉素琥珀酸鈉有較高的交叉反應(yīng)率而對(duì)鏈霉素、青霉素和慶大霉素的交叉反應(yīng)率均小于0.1%。
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