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采用自克隆技術(shù)構(gòu)建高SOD、低雙乙酰的啤酒酵母工程菌
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 168 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 母茜 ,蔡勇 ,王肇悅,張博潤(rùn),任正隆 ,*
關(guān)鍵詞: 啤酒酵母|超氧化物歧化酶|乙偶姻|自克隆
摘要:

用來(lái)源于啤酒酵母自身的超氧化物歧化酶基因SOD1、銅抗性基因CUP1、3-磷酸甘油酸激酶基因PGK1啟動(dòng)子和α-factor基因取代α-乙酰乳酸合成酶基因ILV2內(nèi)部約1.1kb的片段,得到重組質(zhì)粒pMC572,采用同源重組的方法將用內(nèi)切酶酶切質(zhì)粒pMC572得到的含有SOD1、CUP1、PGK1和α-factor以及ILV2兩端序列的片段轉(zhuǎn)化啤酒酵母工業(yè)菌株YSF31,并通過(guò)銅抗性、PCR和AHAS酶活測(cè)定篩選得到轉(zhuǎn)化子。結(jié)果表明啤酒酵母工程菌胞內(nèi)的SOD能夠分泌到胞外,乙偶姻的含量也只有受體菌的50%,而其他發(fā)酵指標(biāo)并沒(méi)有發(fā)生變化。

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