目的:研究靈芝肽(Ganoderma lucidum peptides,GLP)在體外對人肝癌HepG2細胞增殖抑制及誘導凋亡的作用。方法:HepG2細胞用含不同濃度GLP培養(yǎng)基培養(yǎng)12、24、36、48、60h,GLP分為5個濃度梯度,分別為0.25、0.5、1、2、4mg/ml,采用噻唑蘭(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法觀察細胞生長抑制作用,用可見光顯微鏡、熒光顯微鏡觀察細胞形態(tài)學變化、激光共聚焦(laser scanning confocal microscopy,LSCM)觀察細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。結(jié)果:MTT法顯示靈芝肽能顯著抑制人肝癌HepG2細胞的生長,且存在濃度及時間依賴性。鏡下可見細胞出現(xiàn)典型凋亡細胞形態(tài)學改變:細胞染色質(zhì)濃縮,細胞體積縮小、核固縮深染、細胞膜出泡、凋亡小體形成;LSCM觀察到胞內(nèi)鈣離子濃度明顯增加。結(jié)論:0.25~4.0mg/ml的GLP體外可顯著抑制人肝癌HepG2細胞增殖,存在量效關系和時效關系,能誘導人肝癌HepG2細胞凋亡,并且提示細胞內(nèi)鈣離子濃度的升高可能是細胞凋亡的機制之一。
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