采用SYBR Green實時熒光定量PCR技術(shù),建立了食品中大豆轉(zhuǎn)基因成分的定量檢測方法。通過設(shè)計特異引物,擴增內(nèi)源參照基因lectin和轉(zhuǎn)基因靶基因CP4EPSPS,建立兩種基因的拷貝數(shù)-CT標準曲線,根據(jù)標準曲線方程計算樣品中的轉(zhuǎn)基因含量,并且通過熔解曲線分析擴增反應特異性。結(jié)果表明,lectin和CP4EPSPS基因標準曲線線性關(guān)系好,R2值分別為0.9984和0.9953,方法的回收率為95%~110%,檢測限為0.01%。本檢測方法具有快速、靈敏、準確、特異、高通量等優(yōu)點,可以作為食品中大豆轉(zhuǎn)基因成分的定量檢測方法。
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