潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因廣泛用于轉(zhuǎn)基因生物的基因轉(zhuǎn)化過程中,該基因(hpt)編碼的蛋白屬于無食用和食物過敏史的處源目的蛋白。根據(jù)IFBC-ILSI 制定的轉(zhuǎn)基因食品致過敏性評價方法,進行了與已知的過敏蛋白的氨基酸序列相似性比較、消化穩(wěn)定性實驗以及動物模型實驗。結果表明,未發(fā)現(xiàn)連續(xù)8 個氨基酸序列相同;該蛋白在80℃加熱10min 左右時已全部降解,不具有熱穩(wěn)定性;體外模擬消化實驗表明,消化20min 時,SDS-PAGE 和WesternBlotting 已檢測不出Hpt 蛋白。實驗采用BN 大鼠作為過敏模型,ELISA 檢測特異IgG、IgE 以及組胺水平,Hpt 蛋白與陽性存在顯著性差異(p < 0.05),與陰性無顯著性差異。綜合結果表明,Hpt 蛋白潛在致敏性很低。本研究可為進一步開展以hpt 基因為標記性基因的作物上市前安全性的評價提供基礎數(shù)據(jù)。
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