以4-氨基苯甲酸重氮化后與2-萘酚反應(yīng),合成蘇丹紅Ⅰ號的衍生物(CSD Ⅰ),以活性脂法將CSD Ⅰ與蛋白載體偶聯(lián),制備CSD Ⅰ-BSA免疫抗原與CSD Ⅰ-OVA檢測抗原。以CSD Ⅰ-BSA免疫Balb/c小鼠,適當(dāng)免疫后取脾細(xì)胞與SP2/0融合,篩得抗CSD Ⅰ的單克隆抗體細(xì)胞株5H3。以該細(xì)胞株生產(chǎn)抗體與CSD Ⅰ-OVA建立CSD Ⅰ的間接競爭ELISA檢測方法,該方法對蘇丹紅Ⅰ、Ⅲ和對位紅的靈敏度約為0.1ng/ml,IC50分別為1.03、1.13、0.89ng/ml,與其他染料交叉反應(yīng)率低。該ELISA檢測方法靈敏、特異,可用于蘇丹紅Ⅰ、Ⅲ和對位紅的快速檢測。
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