本實(shí)驗(yàn)對(duì)具有茶氨酸生物合成能力的γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GGT)基因工程菌的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化。首先采用Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)影響γ-GGT活性的基因工程菌發(fā)酵條件進(jìn)行篩選。然后將篩選得到的初始pH、培養(yǎng)時(shí)間、異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)誘導(dǎo)溫度3個(gè)關(guān)鍵影響因素進(jìn)行響應(yīng)面分析,通過(guò)對(duì)二次多項(xiàng)回歸方程求解得到該基因工程菌的最佳培養(yǎng)條件為初始pH7.32、培養(yǎng)時(shí)間6.67h、IPTG31.51℃誘導(dǎo)。γ-GGT活性的最大預(yù)測(cè)值為4.60U/ml,實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證值為4.64U/ml。最后通過(guò)基因工程菌催化合成茶氨酸反應(yīng),得到茶氨酸的產(chǎn)量為35.18g/L。
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