將乳酸片球菌接種于MRS培養(yǎng)基,37℃靜置培養(yǎng)17h后產(chǎn)生抑菌物質(zhì)細(xì)菌素。用三步法從培養(yǎng)液中分離純化細(xì)菌素:首先根據(jù)細(xì)菌素在pH6.0時與菌體的吸附力最強(qiáng),pH2.0時吸附力最弱,通過調(diào)節(jié)pH和離心來收集細(xì)菌素,然后經(jīng)過SP Sepharose Fast Flow陽離子交換柱層析和Sephadex G-50凝膠層析進(jìn)行純化,最后細(xì)菌素的得率為0.19%,比活為5.17×104AU/mg,純化了34.54倍。得到的細(xì)菌素樣品通過Tricine-SDS-PAGE電泳出現(xiàn)清晰條帶,大小約為4600D。
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