本研究采用豆粕的乙醇提取物以水飽和正丁醇萃取純化得到大豆總皂甙,用香草醛-高氯酸體系顯色,再采用酶標儀結合三波長法測定和校正吸光值,以期建立大豆總皂甙酶標儀三波長比色定量測定法。結果表明:本方法大豆總皂甙一次提取效率為95.985%,兩次合并提取效率為99.510%;萃取純化效率為90%;皂甙濃度與吸光度之間存在極顯著的線性關系,最低檢出限濃度為19.667μg/ml;精密度實驗的變異系數為2.7%;平均加標樣回收率為95.519%,其變異系數為5.719%;可有效克服皂甙顯色反應不穩(wěn)定、吸光值會隨時間延長而下降的問題,并在一定程度上消除干擾物質和本底漂移對定量分析造成的影響,使測定的精度進一步提高。本方法具有操作簡便、重現性好、精密度高,適于大批量樣品測定以及產品生產的質量控制及監(jiān)測等特點。
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