基因工程菌Y517#能表達(dá)醇醛脫氫酶,將L-山梨糖轉(zhuǎn)化為VC的前體2-酮基-古龍酸(2-KGA)。通過超聲波破碎菌體、硫酸銨分級(jí)沉淀、DEAE Sepharose FastFlow陰離子交換層析,Q Sepharose High Performance柱層析等過程,從Y517#發(fā)酵液中分離純化了重組醇醛脫氫酶,純化倍數(shù)為11倍。研究發(fā)現(xiàn),該酶分子量為66kD,最適作用溫度為40℃,對(duì)熱不穩(wěn)定,在60℃下保溫10min酶活力完全喪失。最適pH值為7.0,pH穩(wěn)定范圍為6.0~9.0。
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