交聯(lián)酶聚集體法是一種新型的無(wú)載體酶固定化方法。本實(shí)驗(yàn)用該法固定化黑曲霉β-葡萄糖苷酶,對(duì)其制備條件、結(jié)構(gòu)特征、酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,β-葡萄糖苷酶酶液在冰水浴中經(jīng)90%的硫酸銨沉淀30min后,以5%戊二醛水溶液進(jìn)行酶聚集體交聯(lián)反應(yīng),可獲得較高活性的交聯(lián)酶聚集體,酶活回收率達(dá)75%,對(duì)對(duì)-硝基苯基-β-D-葡萄糖苷作用的最適溫度、最適pH值和Km值分別為60℃、pH4.0和4.61×10-3mol/L,與游離酶相比,表現(xiàn)更高的底物親和力。將其用于大豆異黃酮活性苷元染料木素的合成,40min內(nèi)對(duì)染料木苷轉(zhuǎn)化率達(dá)到66%。
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