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利用噬菌體肽庫(kù)淘選玉米赤霉烯酮的模擬表位
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 181 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 何慶華, 劉仁榮, 許楊
關(guān)鍵詞: 噬菌體展示肽庫(kù); 玉米赤霉烯酮; 模擬表位; 單克隆抗體;
摘要:

目的:利用噬菌體肽庫(kù)淘選玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)模擬表位。方法:以抗ZEN單克隆抗體為配體,利用噬菌體七肽庫(kù)淘選ZEN的模擬表位,采用了逐輪減少抗體包被濃度,交換使用封阻液中蛋白質(zhì)種類的方法,經(jīng)三輪淘選后,隨機(jī)挑取20個(gè)克隆測(cè)序并以ELISA方法及競(jìng)爭(zhēng)ELISA實(shí)驗(yàn),以確定陽(yáng)性克隆。結(jié)果:獲得10種序列,ELISA顯示其中兩種序列為陽(yáng)性克隆,抑制率達(dá)90%以上,其氨基酸序列分別為DAVILLM,HHCHWWH。結(jié)論:噬菌體展示技術(shù)可淘選到ZEN的模擬表位,淘選到的噬菌體粒子可作為毒素的替代品建立免疫學(xué)檢測(cè)方法。

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