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RNAi沉默淀粉分支酶sbe3基因?qū)λ局辨湹矸鄣挠绊?/div>
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 128 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 陳忠正, 郭健, 李斌, 文海濤, 趙亮
關(guān)鍵詞: 水稻; 淀粉分支酶3; RNA干涉; 直鏈淀粉;
摘要:

本研究利用RNAi技術(shù),通過RT-PCR方法克隆出水稻淀粉分支酶sbe3基因片斷,經(jīng)兩步組裝法將sbe3基因片斷分別正向、反向組裝入pRNAi-ubi,成功構(gòu)建sbe3基因RNAi轉(zhuǎn)化載體pRNAi-ubi/sbe3。在農(nóng)桿菌介導(dǎo)下,對粳稻中花11未成熟胚誘導(dǎo)的愈傷組織進(jìn)行轉(zhuǎn)化,通過PCR、Southern雜交鑒定獲得一批轉(zhuǎn)基因植株。半定量RT-PCR鑒定出轉(zhuǎn)化苗T1代種子中sbe3基因表達(dá)被明顯抑制,但只引起轉(zhuǎn)基因水稻胚乳中直鏈淀粉含量少量的提高,說明采用RNAi僅沉默sbe3基因?qū)λ九呷橹辨湹矸酆繘]有顯著影響。

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