研究利用具有轉(zhuǎn)糖基活性的β-半乳糖苷酶生產(chǎn)含低聚半乳糖的低乳糖牛奶。含低聚半乳糖的低乳糖牛奶既能解決乳糖不耐癥問題,同時(shí)還在牛奶中增添了低聚半乳糖雙歧因子。從Enterobacter sp.B5的無細(xì)胞抽提液中,利用硫酸銨沉淀制備具有轉(zhuǎn)糖基活性的β-半乳糖苷酶,作用鮮牛奶生成含低聚半乳糖的低乳糖牛奶。利用薄層層析、高壓液相色譜技術(shù)和軟件NIH ImageJ 1.36分析了反應(yīng)產(chǎn)物中的糖組分(葡萄糖、半乳糖、乳糖和低聚糖(包括轉(zhuǎn)移二糖和三糖))。結(jié)果顯示酶作用后的鮮牛奶中大約70%的乳糖轉(zhuǎn)化為葡萄糖和半乳糖,至少10%的乳糖通過轉(zhuǎn)糖基反應(yīng)生成低聚半乳糖。在酶濃度為3U/ml,50℃酶解4h的反應(yīng)條件下,獲得含低聚半乳糖的低乳糖牛奶的糖組成為0.59%低聚半乳糖(含0.37%轉(zhuǎn)移二糖和0.22%三糖),1.33%乳糖,2.83%單糖。本研究利用軟件NIH ImageJ 1.36定量分析樣品糖組分的TLC結(jié)果,可以避免乳糖的同分異構(gòu)體-轉(zhuǎn)移二糖在高壓液相色譜結(jié)果中因無法分離而造成的漏檢。
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