研究了菌體培養(yǎng)時(shí)間、溶菌酶作用條件(酶作用溫度、濃度和時(shí)間)對(duì)納豆菌BNK菌株原生質(zhì)體制備和再生的影響。在此基礎(chǔ)之上,考察了不同再生培養(yǎng)基、滲透壓穩(wěn)定劑及原生質(zhì)體保護(hù)劑對(duì)再生率的影響。確定了菌株BNK原生質(zhì)體制備和再生最佳條件為:菌體培養(yǎng)9h收集,0.8mg/ml溶菌酶,30℃作用40min制備原生質(zhì)體,將原生質(zhì)體液涂布于以甘露醇為滲透壓穩(wěn)定劑、添加有淀粉的PYG培養(yǎng)基中再生,此時(shí)原生質(zhì)體制備率達(dá)98.2%,再生率為28.4%。
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