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可用于基因檢測的啤酒發(fā)酵液DNA提取方法研究
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 144 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 李艷琴, 孫永艷
關(guān)鍵詞: 啤酒發(fā)酵液; DNA提取方法; PCR擴增;
摘要:

用玻璃珠法、溶菌酶法、凍融法、氯化芐(phCH2Cl)法提取啤酒發(fā)酵液、生產(chǎn)用啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、K氏酵母、啤酒生產(chǎn)污染細菌(T)、G-細菌(E.coli.DH5α)和G+細菌(BacillusYK-1R)的基因組DNA。溶菌酶法和凍融法對細菌的裂解率為99%~100%,對酵母的裂解率只有15%~28%;玻璃珠法對酵母的裂解率為92%~94%;phCH2Cl法對細菌和酵母的裂解率均為100%。對提取的啤酒發(fā)酵液基因組DNA濃度進行測定,結(jié)果為:玻璃珠法15.4g/ml、溶菌酶法18.0g/ml、凍融法13.8g/ml、phCH2Cl法40.7g/ml。電泳檢測結(jié)果表明,除凍融法外,其余3種方法得到的混合菌DNA片段均大于23kb,無拖尾、無蛋白污染。phCH2Cl法圖譜更清晰,DNA得率108μg/g濕菌體,RAPD-PCR圖譜重復(fù)性好。為用基因診斷技術(shù)在線檢測啤酒發(fā)酵過程中微生物污染,提供了一種可靠的DNA提取方法。

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