領(lǐng)學術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的:比較研究LPS和O-SP的免疫原性,制備出特異性抗內(nèi)毒素(LPS)雞卵黃免疫球蛋白(eggyolkimmunoglobulin,IgY),用于對E.coliO157:H7的免疫預防及檢測。方法:分別用滅活E.coliO157:H7菌體、不同濃度內(nèi)毒素(LPS)及O-特異性多糖鏈(O-SP)與不完全弗氏佐劑充分乳化后作抗原免疫臨產(chǎn)蛋母雞,以水稀釋法從卵黃中提取抗體,陰離子交換色譜法實現(xiàn)對抗體的純化,間接ELISA及雙向免疫擴散檢測抗體產(chǎn)生效價與活性。結(jié)果與結(jié)論:所制內(nèi)毒素(LPS)和O-SP均有較好的免疫原性,刺激雞體后可產(chǎn)生高效價抗體,滅活菌體、600μg/mlLPS、1200μg/mlLPS、2000μg/mlLPS、O-SP抗體產(chǎn)生效價最高可分別達1:32000、1:28000、1:32000、1:12000、1:40000。結(jié)合離子交換色譜,用0.185mol/L的離子強度可實現(xiàn)一步洗脫純化抗體,制備出高純度、高活性、特異性強的雞卵黃免疫球蛋白IgY,為大腸桿菌O157:H7的感染防治提供了可靠的保證,在此實驗基礎(chǔ)之上可進一步探討應(yīng)用特異性IgY對大腸桿菌O157:H7的檢測。
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