以羅非魚(yú)皮為原料,采用5?種蛋白酶對(duì)其進(jìn)行酶解,以羅非魚(yú)皮酶解物多肽(tilapia skin protein peptides,TSPP)的Fe2+結(jié)合率為指標(biāo),篩選出Fe2+結(jié)合率最高的TSPP;探究結(jié)合時(shí)間、pH值、溫度對(duì)結(jié)合率的影響以及TSPP結(jié)合Fe2+前后其熒光、紫外、紅外等光譜的變化;對(duì)TSPP的分子質(zhì)量分布、氨基酸的組成及其抗氧化活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明,羅非魚(yú)皮蛋白經(jīng)胰蛋白酶水解2?h后得到的TSPP,其Fe2+結(jié)合率最高;pH?5、溫度37?℃、時(shí)間90?min為最佳結(jié)合條件;TSPP結(jié)合Fe2+后,肽鏈發(fā)生折疊,其內(nèi)源性熒光強(qiáng)度下降,紫外特征性吸收帶出現(xiàn)紅移,肽鏈中的氨基、羰基、羧基可能是Fe2+的結(jié)合位點(diǎn);TSPP中的Fe2+結(jié)合活性肽,其分子質(zhì)量大約在500~3?000?Da之間,且肽鏈富含Asp、Glu、Gly、Arg及Pro等氨基酸;各酶解物均具有一定的抗氧化能力,TSPP結(jié)合Fe2+前后,其抗氧化能力無(wú)顯著性變化;此外,雖然TSPP的抗氧化能力明顯低于谷胱甘肽,但其Fe2+結(jié)合活性明顯高于谷胱甘肽。結(jié)果顯示,TSPP具有良好的Fe2+結(jié)合活性,有望發(fā)展為新型的鐵元素膳食補(bǔ)充劑。
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