利用熒光光譜、紫外光譜、傅里葉變換紅外光譜法,研究不同NaCl濃度下麥醇溶蛋白(gliadin,G)與槲皮素(quercetin,Q)的相互作用。熒光光譜分析結(jié)果表明:不同NaCl濃度下,Q導(dǎo)致G熒光猝滅現(xiàn)象的發(fā)生,且隨NaCl濃度的增大,熒光強(qiáng)度伴隨明顯藍(lán)移現(xiàn)象(10?nm左右);當(dāng)Q濃度為50?μmol/L時(shí),熒光猝滅率為96%~98%,表明兩者發(fā)生強(qiáng)相互作用;Q對(duì)G產(chǎn)生靜態(tài)或動(dòng)、靜態(tài)結(jié)合的猝滅作用;50?mmol/L?NaCl濃度下,G與Q的結(jié)合常數(shù)(Ka)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)(n)數(shù)值最大,為4.87×107?L/mol和1.477?1,說明添加適量NaCl有利于相互作用的增強(qiáng)。熱力學(xué)數(shù)據(jù)分析結(jié)果表明:50?mmol/L?NaCl濃度下,G與Q之間主要為疏水作用力,而其他NaCl濃度下,G與Q之間主要為氫鍵相互作用。同步光譜和紫外光譜分析結(jié)果表明:Q改變了G中芳香族氨基酸所處的微環(huán)境,使蛋白分子構(gòu)象發(fā)生變化,且色氨酸殘基對(duì)蛋白固有熒光的猝滅貢獻(xiàn)更大。傅里葉變換紅外光譜和拉曼光譜分析結(jié)果表明:在特定NaCl濃度下G與Q存在特定作用方式,氫鍵或疏水相互作用在復(fù)合物的形成中起重要作用,蛋白質(zhì)的二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)及氨基酸側(cè)鏈微環(huán)境發(fā)生改變。研究結(jié)果證明,NaCl濃度影響蛋白-多酚的相互作用,添加適量NaCl有利于G和Q的結(jié)合以及蛋白質(zhì)的構(gòu)象變化。本研究為Q作為一種天然食品添加劑應(yīng)用于小麥制品提供了理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
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