本文研究了單酶和復(fù)合酶水解羅非魚魚皮膠原蛋白制備抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)的工藝條件。通過正交試驗確定了菠蘿蛋白酶和Alcalase2.4L蛋白酶單獨水解魚皮膠原蛋白的最適酶解條件。菠蘿蛋白酶和Alcalase2.4L蛋白酶的最適酶解溫度,pH,酶/底物,時間,底物濃度分別為45℃,pH4.5,4000U/g,4h,6%和55℃,pH7.5,6000μ/g,2h,4%。在單酶水解的基礎(chǔ)上,進行復(fù)合酶水解實驗,結(jié)果表明:先采用菠蘿蛋白酶水解,再用Alcalase2.4L蛋白酶水解,效果更佳。采用該雙酶復(fù)合水解工藝,所得水解產(chǎn)物的水解度為30.43%,體外對ACE的抑制率達68.6%。采用SephadexG-25,HPLC的分離方法對酶解液進行分離純化,得到了高抑制活力的組分。所得水解原液,SephadexG-25過柱所得高活力組分的IC50分別為2.82mg/ml和0.65mg/ml。
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