目的:研究不同鋅補(bǔ)加形式和補(bǔ)加水平對(duì)體外培養(yǎng)胸腺細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制。方法:采用地塞米松作為誘導(dǎo)劑,建立小鼠胸腺細(xì)胞體外培養(yǎng)的凋亡模型,培養(yǎng)基中分別補(bǔ)加0、50、100、500、1000μmol/L的硫酸鋅或蛋氨酸鋅,培養(yǎng)16h。測(cè)定細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、DNA片段化等指標(biāo)。結(jié)果:添加硫酸鋅與蛋氨酸鋅對(duì)體外地塞米松誘導(dǎo)的小鼠胸腺凋亡均有抑制作用。不同濃度的鋅均能在一定程度上抑制凋亡的發(fā)生,減少DNA片段化,且這種抑制作用具有劑量效應(yīng)。50~100μmol/L添加水平時(shí),蛋氨酸鋅對(duì)細(xì)胞凋亡的抑制作用低于硫酸鋅(p<0.05),但蛋氨酸鋅處理組細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度顯著高于硫酸鋅處理組(p<0.05)。500~1000μmol/L時(shí),兩種鋅對(duì)凋亡抑制作用相近(p>0.05),蛋氨酸鋅處理組細(xì)胞內(nèi)鈣濃度明顯高于硫酸鋅處理(p<0.05)。鋅水平增加顯著降低細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度(p<0.05);鋅補(bǔ)加水平升高時(shí),胞內(nèi)Cu、Zn-SOD活性隨之增高,細(xì)胞培養(yǎng)上清液中AKP活性也有上升趨勢(shì)。結(jié)論:兩種鋅源均能抑制地塞米松體外誘導(dǎo)的胸腺細(xì)胞凋亡,其機(jī)制可能涉及到細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度、細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)的變化等生理生化過(guò)程。
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