目的:分離純化冰島刺參(Cucumaria frondosa)中的縮醛型磷脂酰乙醇胺(plasmenylethonoamine,pPE)和烷氧型磷脂酰膽堿(plasmanylcholine,aPC),并對其促進神經(jīng)生長因子(nerve growth factor,NGF)誘導的大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤(pheochromocytoma,PC12)細胞分化的神經(jīng)營養(yǎng)作用進行探究。方法:以冰島刺參為原料,通過柱層析分離法提取pPE和aPC,并通過液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定其純度;分析冰島刺參pPE和aPC對PC12細胞存活率和分化率的影響,并統(tǒng)計分析細胞軸突長度和數(shù)目的變化;進一步通過實時熒光定量聚合酶鏈式反應、免疫熒光技術等方法檢測PC12分化細胞中突觸素和生長相關蛋白43(growth-associated protein 43,GAP-43)的表達量,明確冰島刺參pPE和aPC對PC12細胞突觸生長及分化的影響。結(jié)果:制備獲得的冰島刺參pPE和aPC純度分別為91.0%和89.1%,兩種不同結(jié)構(gòu)的磷脂均可顯著提高PC12細胞的分化率(P<0.05),通過促進突觸素和GAP-43的表達促進細胞軸突生長,pPE的作用效果優(yōu)于aPC。結(jié)論:體外細胞實驗結(jié)果表明冰島刺參pPE和aPC能顯著促進PC12神經(jīng)細胞分化及突觸生長,且具有濃度依賴性和構(gòu)效性。但詳細的作用機制仍需進一步研究。
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