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廣譜拮抗菌株的篩選誘變及抗菌物質(zhì)分離鑒定
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 143 發(fā)表時間: 2021-01-21
作者: 高兆建,王秋芬,丁飛鴻,許祥,趙宜峰,焦魏,陳騰
關(guān)鍵詞: 地衣芽孢桿菌;誘變;抗菌;純化;脂肽
摘要:

分離和鑒定產(chǎn)生廣譜抗菌活性物質(zhì)的菌株,并對抗菌物質(zhì)分離鑒定。通過形態(tài)學(xué)、生理生化特征和16S rDNA序列分析鑒定菌株。采用紫外線-硫酸二乙酯化學(xué)復(fù)合誘變的方法,獲得抗菌能力強、遺傳穩(wěn)定的高產(chǎn)菌株。分別用甲醇提取、凝膠過濾色譜(Sephadex G-10)和半制備高效液相色譜分離純化抗菌物質(zhì),基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技術(shù)對抗菌物質(zhì)鑒定。本研究從土壤中分離出67 株芽孢桿菌。其中8 株表現(xiàn)出較強的抗菌作用,菌株XF32表現(xiàn)出顯著廣譜抑制活性,并鑒定為地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)。菌株XF32對金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、銅綠假單胞菌7 種病原菌具有抗菌活性,對釀酒酵母、黑曲霉、深綠木霉和尖孢鐮刀菌有抗真菌活性。經(jīng)誘變篩選得到突變菌株XF32-22,對金黃色葡萄球菌的抑菌活性比原始菌株顯著提高,分離純化抗菌物質(zhì),得到單一的抗菌成分。MALDI-TOF-MS分析表明抗菌物質(zhì)為Fengycin系脂肽化合物。采用復(fù)合誘變技術(shù),可以有效地提高地衣芽孢桿菌脂肽的產(chǎn)量。成功分離得到對多種病原細菌具有較強抑制作用的Fengycin類脂肽,同時該菌株在拮抗植物病原真菌方面也有明顯效果。XF32-22菌株在食品保鮮和農(nóng)業(yè)生物防治方面具有很好的應(yīng)用前景。

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