以桑葚為原料,在經(jīng)過大孔樹脂純化的基礎(chǔ)上,通過高速逆流色譜技術(shù)對桑葚花色苷進(jìn)行分離純化,結(jié)合紫外-可見光譜、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用及核磁共振技術(shù)對分離純化得到的組分進(jìn)行鑒定,同時(shí)測定桑葚花色苷粗提取物和分離得到的花色苷組分對脂質(zhì)體抑制率和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)自由基清除能力。最終確定正丁醇-甲基叔丁基醚-乙腈-水-三氟乙酸(2∶2∶1∶5∶0.01,V/V)為兩相溶劑體系,以上相為固定相、下相為流動(dòng)相,在主機(jī)轉(zhuǎn)速850 r/min、流速2 mL/min、檢測波長254 nm條件下進(jìn)行分離純化,最終得到4 個(gè)分離組分(組分I、II、III、IV)。經(jīng)鑒定發(fā)現(xiàn)組分IV為非花色苷類,組分I、II和III分別為飛燕草素-3-葡萄糖苷、矢車菊素-3-葡萄糖苷和天竺葵素-3-葡萄糖苷,其含量和純度分別為17.4、33.7、9.8 mg/100 mg和92.27%、94.05%、90.82%。桑葚花色苷粗提物以及組分I、II和III對抑制脂質(zhì)體過氧化和DPPH自由基清除率的半抑制濃度分別為(0.77±0.02)、(0.34±0.02)、(0.55±0.04)、(0.68±0.01)g/L和(0.40±0.01)、(0.16±0.01)、(0.22±0.01)、(0.35±0.03)g/L。
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