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雙水相法制備鱖魚(Siniperca chuatsi)肌動蛋白及定量分析
來源:食品科學網 閱讀量: 170 發(fā)表時間: 2020-06-29
作者: 王洋洋,徐明芳,白衛(wèi)濱,鄭春麗,葉蕾,鄭琴琴
關鍵詞: 鱖魚;雙水相分離;肌動蛋白;毛細管電泳;響應面優(yōu)化
摘要:

以鱖魚肌原纖維蛋白為研究對象,通過高分子與低分子醇-鹽雙水相體系成相能力分析,建立雙水相分離純化鱖魚肌動蛋白的方法,基于高效毛細管膠束電動色譜(micellar electrokinetic capillary chromatography,MECC)耦合二極管陣列檢測器(diode array detector,DAD)探索MECC-DAD法定量檢測鱖魚肌動蛋白的新方法。結果表明,通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳純度鑒定和肌動蛋白提取率計算確定異丙醇-硫酸銨雙水相體系為最佳分離體系,在單因素試驗的基礎上,利用響應面法分析確定了雙水相提取鱖魚肌動蛋白的最佳工藝條件:當異丙醇質量分數26%、硫酸銨質量分數11%、pH 9.0時,鱖魚樣品肌動蛋白提取率為11.04%,與模型預測值接近。MECC-DAD分析結果顯示,肌動蛋白的定量出峰時間約為10 min,毛細管電泳圖譜基線平穩(wěn)無雜峰。本實驗為名貴魚類質量品質屬性的鑒定及魚類肌動蛋白標準品的研制奠定基礎,為魚類蛋白功能開發(fā)利用及快速定量檢測提供理論依據。

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