為闡明釀酒酵母固醇與耐鹽特性的關系,構建麥角固醇合成關鍵基因ERG3敲除菌株Bs-1;平板驗證發(fā)現(xiàn),Bs-1在60 g/L NaCl-酵母浸出粉胨葡萄糖(yeast extract peptone dextrose,YPD)平板上菌落生長被抑制,在80 g/L NaCl-YPD平板上完全不能生長;運用氣相色譜-質譜聯(lián)用檢測菌株中固醇的種類和含量,發(fā)現(xiàn)Bs-1不能合成麥角固醇,卻合成了5,6-二氫麥角固醇。此外,分析Bs-1和野生菌株BY4741的代謝發(fā)現(xiàn),在60 g/L NaCl-YPD中, Bs-1的最大OD600 nm為5.56±0.30,比BY4741降低了45%;Bs-1的最高乙醇產(chǎn)量為(4.20±0.00)g/L,比BY4741降低了35%;在鹽脅迫條件下,Bs-1與BY4741相比會產(chǎn)生大量胞外甘油,但細胞對甘油的保留能力卻減弱。結果表明酵母中固醇種類的變化影響了細胞代謝特性和細胞膜的流動性,造成細胞胞內甘油外排增加,導致細胞耐鹽性降低。
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