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解淀粉芽孢桿菌mtnN基因?qū)ζ渖锖铣蒘-腺苷甲硫氨酸的影響
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 154 發(fā)表時間: 2020-03-30
作者: 阮麗英,溫志友,魏雪團(tuán)
關(guān)鍵詞: S-腺苷甲硫氨酸;解淀粉芽孢桿菌;S-腺苷高半胱氨酸核苷酶;反義RNA;代謝工程
摘要:

為探索解淀粉芽孢桿菌中mtnN基因編碼的S-腺苷高半胱氨酸核苷酶對S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)合成的影響,通過基因敲除技術(shù)和反義RNA抑制技術(shù)構(gòu)建了針對mtnN基因的系列工程菌株。與出發(fā)菌株HZ-12相比,缺失mtnN基因的菌株SAM產(chǎn)量和生物量分別下降了51%和26%,說明完全阻斷該基因不利于菌體的生長和產(chǎn)物的合成。進(jìn)一步通過反義RNA微調(diào)抑制mtnN基因的表達(dá),與對照菌株HZ-12/pHY300相比,所構(gòu)建的反義RNA工程菌HZ-12/pHY-mtnNasRNA-1、HZ-12/pHY-mtnNasRNA-2和HZ-12/pHY-mtnNasRNA-3生物量沒有顯著性變化,且其SAM產(chǎn)量分別達(dá)到14.58、12.27 mg/L和12.49 mg/L,相比對照分別提高了44%、22%和24%。本研究不僅闡釋了mtnN基因?qū)AM合成的影響規(guī)律,而且為SAM高產(chǎn)工程菌株的構(gòu)建提供了新的思路。

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