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—— 中國(guó)食品雜志社
目的：探討羅非魚頭磷脂（tilapia head phospholipid，TH-PL）對(duì)破骨細(xì)胞生物活性的影響。方法：首先采用溶劑法提取羅非魚頭總脂，通過硅膠柱層析分離得到TH-PL，采用薄層色譜（thin layer chromatography，TLC）、傅里葉紅外變換光譜（Fourier transform infrared spectroscopy，F(xiàn)TIR）和氣相色譜分析其性質(zhì)與部分結(jié)構(gòu)。其次利用核因子κB受體活化因子受體的配體（receptor activator for nuclear factor-κB ligand，RANKL）體外誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞分化為破骨細(xì)胞，建立破骨細(xì)胞模型，抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase，TRAP）染色法評(píng)價(jià)TH-PL對(duì)RAW264.7細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的影響，熒光染色法、流式細(xì)胞儀測(cè)定法和蛋白免疫印跡法檢測(cè)TH-PL對(duì)破骨細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果：制備的TH-PL占羅非魚頭干質(zhì)量的1.52%，TLC和FTIR法確定所得樣品為TH-PL，且含有豐富的不飽和脂肪酸，約占38%。TRAP染色實(shí)驗(yàn)表明，50、100 μg/mL TH-PL顯著抑制RAW264.7分化為破骨細(xì)胞；進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證明，TH-PL能夠引起破骨細(xì)胞線粒體跨膜電位下降，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)caspase-3的蛋白表達(dá)量上升，誘導(dǎo)破骨細(xì)胞凋亡。結(jié)論：體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證明，TH-PL具有顯著的抑制破骨前體細(xì)胞分化和促進(jìn)破骨細(xì)胞凋亡的作用。
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