目的:探討綠色木霉發(fā)酵法制備的脫脂米糠可溶性膳食纖維(soluble dietary fiber from defatted rice bran,DRB-SDF)對(duì)小腸葡萄糖吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的影響及其作用機(jī)制。方法:以Caco-2細(xì)胞為研究對(duì)象,分別建立葡萄糖吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)模型,設(shè)置正常組、陽(yáng)性阿卡波糖對(duì)照組(25?μg/mL)以及DRB-SDF低、中、高(2、4、8?mg/mL)劑量組。在DRB-SDF作用一定時(shí)間后,采用CCK-8法檢測(cè)Caco-2細(xì)胞活力、氧化酶-偶聯(lián)比色法檢測(cè)葡萄糖質(zhì)量濃度、酶活力檢測(cè)試劑盒測(cè)定α-葡萄糖苷酶活力、逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測(cè)定α-葡萄糖苷酶以及SGLT-1、GLUT-2和Na+-K+-ATP酶mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果:DRB-SDF質(zhì)量濃度小于8?mg/mL時(shí)對(duì)Caco-2細(xì)胞增殖未產(chǎn)生顯著影響。相比于正常組,DRB-SDF低、中、高劑量組葡萄糖吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)水平均被抑制,并呈濃度依賴性。DRB-SDF作用后,Caco-2細(xì)胞α-葡萄糖苷酶活力明顯被抑制,同時(shí)α-葡萄糖苷酶、SGLT-1、GLUT-2和Na+-K+-ATP酶mRNA的表達(dá)水平均顯著下降(P<0.05)。結(jié)論:DRB-SDF可能通過抑制α-葡萄糖苷酶活性,降低小腸上皮細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體蛋白SGLT-1、GLUT-2和Na+-K+-ATP酶mRNA的表達(dá),抑制碳水化合物水解,占據(jù)葡萄糖的吸收位點(diǎn)等途徑,延緩小腸葡萄糖的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn),最終降低餐后高血糖。
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