建立巴氏殺菌乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白的高相液相色譜分析方法。樣品經(jīng)水稀釋、調(diào)節(jié)pH值至4.6沉淀酪蛋白,過濾后采用Xbridge Protein BEH C4柱分析,經(jīng)體積分?jǐn)?shù)0.1%三氟乙酸-水溶液、體積分?jǐn)?shù)0.09%三氟乙酸-乙腈溶液梯度洗脫、紫外檢測器檢測、外標(biāo)法定量。結(jié)果表明:α-乳白蛋白在10~500 mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)為0.999 87;當(dāng)牛乳中α-乳白蛋白加標(biāo)量為200~1 032 mg/L,加標(biāo)回收率為97.9%~104.0%、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)為0.00%~1.09%;β-乳球蛋白在20~900 mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)為0.999 96;當(dāng)牛乳中β-乳球蛋白加標(biāo)量為600~4 727 mg/L,加標(biāo)回收率為96.1%~103.0%、RSD為0.00%~2.23%。該方法分離效果好、重復(fù)性好,適用于巴氏殺菌乳中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的準(zhǔn)確定量。
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