本研究采用改良的黏蛋白富集培養(yǎng)基結(jié)合實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)檢測(cè)了48 份母嬰糞便樣品,優(yōu)化了分離效果,從8 份陽(yáng)性樣品中分離純化到24 株嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,Akk)。基于16S rRNA基因測(cè)序以及Akk菌株特異引物PCR擴(kuò)增結(jié)果,24 株菌全部隸屬于Akk。基因外重復(fù)回文序列PCR遺傳指紋圖譜可將24 株菌劃分為4 個(gè)基因型小群。同時(shí)對(duì)24 株菌的模擬胃腸液耐受能力、疏水性、抗生素敏感性、聚糖利用能力進(jìn)行體外檢測(cè)。結(jié)果顯示,菌株HN18D-1、HN18D-3、WW48D1-13對(duì)模擬胃、腸液耐受性最高。所有Akk分離株對(duì)萬(wàn)古霉素、克林霉素、卡那霉素和紅霉素具有一定的耐藥性,低聚木糖、大豆低聚糖對(duì)Akk菌株具有益生元效應(yīng)。綜合以上各項(xiàng)體外益生特性,Akk分離株HN18D-1、HN18D-3、WW48D1-13可作為潛在益生菌菌株進(jìn)行后續(xù)系統(tǒng)的研究。
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